对虾人工研究
对虾养殖是海水养殖的一大产业，人工培育苗种是该产业的主要环节。长期以来人工育苗所需亲虾主要采捕于自然海区，由于对虾具有独特的生殖系统和生殖行为，雄虾在雌虾产卵前就已将精荚输入雌虾交接器内，在其产卵时释放出精子。因此，为了提高亲虾使用率和解决亲虾运输受伤或脱壳引起的受精困难问题，台湾的林明男、丁云源等及国内有关单位开展对虾精荚移植技术研究，并将移植技术运用于对虾杂交育种方面。本文就对虾人工移植精荚技术在对虾育苗生产中应用进行试验，使有限亲虾资源得到充分利用和保护，从而降低育苗成本、提高孵化率，达到增产目的。现就试验结果报告于下。
一、材料与方法
1.试验材料：斑节对虾（Penaeusmonodon）由马来西亚海区采捕进口（体长16.3cm～24.9cm，体重70.0g～158.0g）。长毛对虾（P.penicillatus）购自厦门海域采捕（体长13.1cm～15.7cm，体重27.6g～41.2g）。2.试验池条件：全为室内水泥池，规格分别为2.5m×4.0m×1.2m、3.0m×10.0m×1.9m、4.5m×6.0m×1.9m。水源均为运水船从外海运入，经沉淀、过滤、消毒后的育苗水。3.雄虾促排方法：采用夹取法、挤压法和虹吸法。夹取法：用眼科镊子轻轻插入雄亲虾第五步足基部的生殖孔，自然张开夹取精荚。为防止操作时因雄虾跳动受伤或离水过久死亡，夹取精荚时雄虾用湿毛巾包裹，仅留出夹取部位。挤压法：用大拇指及食指挤压雄亲虾第五步足基部，使精荚自生殖孔排出。虹吸法：采用注射器或吸管，从第五步足基部生殖孔插入将精荚吸出。4.精荚移植方法：由单人操作，将准备移植精荚的雌亲虾放入手术用的充气海水塑料盆内，用湿毛巾把雌亲虾包住，在毛巾缺口处留出纳精囊位置，左手握虾掌心向上，拇指、食指轻轻夹住头胸甲，后三指握住腹部，使虾无法弓起弹跳，并将头胸甲呈倾斜状置于盆内充气海水中。右手持弯头眼科镊子，夹取消毒脱脂棉将纳精囊表面的海水吸干，用加工过10cm呈“八字形”弯曲眼科镊子从纳精囊中间Y缝线插入，放手让镊子自然张开倒向尾部，再用另一弯头眼科镊子夹取已处理的精荚放入囊腔内，后用左手拇指轻按纳精囊取出扩张用镊子，检查精荚已放置好不会掉出，揭开毛巾将雌虾放入池内。
二、结果
1.人工移植精荚技术在对虾育苗生产中应用试验于每年3月至5月进行，其结果见表1、表2。试验结果表明，斑节对虾个体大壳较厚，实施人工移植精荚手术时间以脱壳后12小时～24小时内进行最佳，效果最好，成功率最高。脱壳后10小时内实施移植精荚手术，因虾壳偏软，会划伤纳精囊和伤及亲虾，术后亲虾体质恢复较慢，也容易引起死亡和褐变。如果脱壳后超过26小时，虾壳变硬，纳精囊失去弹性，此时实施移植精荚手术困难，难以获得理想的手术效果。通过对人工移植精荚后雌亲虾促熟观察，一般经4天～5天精养卵巢可发育成熟再次产卵。表2结果显示，经人工移植精荚的雌亲虾与未脱壳再产雌虾比较，幼体在变态发育等方面与正常苗生长无明显差别。表3、表4列出长毛对虾雌亲虾实施人工移植精荚试验结果。表3数据显示长毛对虾雌亲虾在脱壳后36小时～72小时内实施移植精荚手术效果最好，可获得较高成功率。而在脱壳后24小时以内实施移植精荚手术，不但难以获得满意效果，同时死亡率也较高。说明长毛对虾壳薄，刚脱壳后不久虾体虚弱，如马上实施移植精荚手术，不但成功率较低（10%～12.5%），还易引起亲虾死亡。表4数据显示长毛对虾雌亲虾人工移植精荚个数变化对孵化率有一定影响。长毛对虾雌亲虾实施移植精荚后，在人工促熟精养期间其瓣状体需6天～7天才萎缩成豆状脱落，比自然交配的雌亲虾瓣状体脱落时间迟1天～2天。此外，雌亲虾术后恢复需经8天～9天精养性腺才能达到成熟产卵。2.雄虾精荚促排结果雄虾促排试验使用59尾亲虾，其中夹取组27尾，试验后雄亲虾存活22尾，挤压组32尾，试验后雄性亲虾存活8尾，可见夹取法的成活率高于挤压法（见表5）。表5的数据表明，经过夹取法促排后，雄性亲虾再次成熟率分别为93.3%和66.7%，而挤压法雄性亲虾再次成熟率为零。说明雄性亲虾精荚促排方法以夹取法为最佳，其次为挤压法。因斑节对虾壳厚，采用挤压法不易获得精荚，还会因操作不当导致雄性亲虾受伤死亡。同样，长毛对虾壳薄，只要雄亲虾精荚成熟度好，采用挤压法虽可获得完整精荚，但往往因挤压时力度掌握不当，引起雄性亲虾损伤，甚至死亡。虹吸法促排，在操作上需两人配合才能进行，且难以获得完整精荚。斑节对虾的精荚呈三角形、较大，如用吸管或注射器吸取，往往仅将精荚乳白色物体吸出，无法吸出完整的精荚。而长毛对虾的精荚呈细长条状，精荚膜很薄，容易被吸破。
三、讨论
1.从试验观察到斑节对虾和长毛对虾在室内全暗环境里脱壳次数多、脱壳间距时间短，与曾文阳所报道相同。其次，斑节对虾与长毛对虾在全暗环境下的自然交配率为零，这一现象与林明男、洪德仁等所指出一致。可见在生产中尽管使用大量雄性亲虾，但在室内全暗的促熟池里仍无法获得自然交配雌虾的原因。2.人工实施移植精荚是育苗生产在短时间内获得可使用雌亲虾的有效途径。在实施移植手术过程观察到精荚植入纳精囊后，雌亲虾会自行分泌黏液将纳精囊闭合，没有植入精荚的雌亲虾则无黏液分泌，该现象与林明男的描述是一致的。但是，不论是斑节对虾或是长毛对虾，一旦纳精囊变硬后再植入精荚，没有观察到黏液分泌，纳精囊也无法正常闭合。因此，分泌黏液闭合纳精囊是否与雌虾甲壳变硬有关，值得进一步探讨。3.在生产试验中还观察到，瓣状体与精荚一起移植后，留在体外的瓣状体有被雌虾摄食的现象，尤其在精养促熟中这种情况最明显。术后亲虾侧卧池底或网箱内，用步足将瓣状体送入口中吃掉，使刚植入的精荚被拉出纳精囊失落水中，出现这种情况是否与饵料或其他刺激有关，尚需作进一步观察。4.对实施移植精荚后雌虾产卵孵化率观察，结果与林明男、张子平等的观察基本一致。鉴于斑节对虾移植精荚后直接放入生产性大池（27m2）产卵，产卵量和孵化率采样计算有难度，因此，采取计算无节幼体数量方式进行比较。从实施移植精荚组孵化幼体生长观察看，其变态、生长与未脱壳再产卵组孵化的幼体并无差别，成活率也达50%以上。可见，采用人工移植精荚后对雌虾产卵孵化幼体的生长没有异常影响。5.在雄性亲虾促排试验中，精荚一般是同步成熟，成双释放。尤其是精荚囊饱满、第五步足基部明显发白的雄性亲虾，促排时双侧释放最明显。同时，一次促排仅能获得两个精荚，促排后雄性亲虾在恢复至再成熟期间，不能促排成型的精荚，只能排出或夹取出粘状物，此现象与张子平所报道相同。6.经过反复比较试验，认为生产中以采用夹取法获取精荚方法为主。因为，夹取法获取精荚，偶尔会因操作不当造成机械伤害，但经过一段时间精养，雄性亲虾还可促熟再用。而挤压法获取精荚，常因用力不当，造成雄性亲虾鳃部或心脏不可恢复损伤、引起死亡，即使没有死亡，雄性亲虾体质恢复慢，难于在短期内再次成熟促排。所以，在育苗生产获取精荚方法以夹取法获取精荚简便易行，比较容易被生产者所接受。
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